ADN recombinante artificial y natural

ACTIVIDAD 20 

ADN RECOMBINANTE ARTIFICIAL

Tema: Producción de proteínas candidatas como dianas terapéuticas contra la malaria

Objetivos:  

• Extracción del gen cyrpa de muestras sanguíneas de pacientes del sur de México.
• Secuenciación del gen cyrpa y análisis de polimorfismos.
• Clonación del gen cyrpa en un plásmido para su utilización en la transformación de células procariotas.
• Expresión de la proteína CyRPA en células procariotas.

Gen o secuencia a clonar: Gen cyrpa

Enzima de restricción: BamHI y Ndel

Enzima ligasa: Ligasa de ADN T4

Vector: pET-9a(+)

Célula receptora: Procariota - Escherichia coli cepa BL21 (DE3)

Mecanismo de transferencia: Transformación por Shock Térmico

Métodos de identificación de clones: 

• Por medio de cultivo líquido en medio Luria-Bertani (contabilizo número de colonias)
• PCR,  Electroforesis en gel de poliacrilamida-SDS, Técnicas fluorométricas (SYBR Green). 
• Gen resultante cyrpa
• Proteína obtenida CyRPA
• Se plantea el uso de vectores virales recombinantes como estrategias prometedoras en la lucha contra la malaria (1)

Imagen obtenida de: https://repositorio.ual.es/handle/10835/10260

ADN RECOMBINANTE NATURAL

Transposones o genes saltarines  

Son secuencias de ADN que tienen la capacidad de poder cambiarse de posición en el genoma. Por tanto son capaces de generar diversas formas de expresión de genes o a su vez mutaciones.(2)

Imagen obtenida de: https://ciencia.estudiareneuropa.eu/s/3975/76710-Medicina-Sanidad/4085608-Los-transposones-y-el-desarrollo.htm

Referencias Bibliográficas

1. Cebrián J. Producción de proteínas candidatas a dianas terapéuticas frente a la malaria. Universidad de Almería [Internet]. 2020 [citado el 17 de julio de 2024]. Disponible en: https://repositorio.ual.es/handle/10835/10260

2. Kumar A. Saltar: transposones dentro y fuera del laboratorio. F1000Res [Internet]. 2020 [citado el 18 de julio de 2024];9(135):135. Disponible en: https://f1000research.com/articles/9-135/pdf